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高效液相色譜分析法和氣相色譜法的區別

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?高效液相色譜分析法(HPLC),它的基本概念及理論基?。ㄈ綾A糝?、塔板理論、速率理論、容量因子、分離度等),與氣相色譜是一致的,但又有不同之處:高效液相色譜與氣相色譜的主要區別可歸結于以下幾點:

  (1)進樣方式的不同:高效液相色譜只要將樣品制成溶液,而氣相色譜需加熱氣化或裂解;

  (2)流動相的不同,在被測組分與流動相之間、流動相與固定相之間都存在著一定的相互作用力;

  (3)由于液體的粘度較氣體大兩個數量級,使被測組分在液體流動相中的擴散系數比在氣體流動相中約小4~5個數量級;

  (4)由于流動相的化學成分可進行廣泛選擇,并可配置成二元或多元體系,滿足梯度洗脫的需要,因而提高了高效液相色譜的分辨率(柱效能);

  (5)高效液相色譜采用5~10Lm細顆粒固定相,使流體相在色譜柱上滲透性大大縮小,流動阻力增大,必須借助高壓泵輸送流動相;

  (6)高效液相色譜是在液相中進行,對被測組分的檢測,通常采用靈敏的濕法光度檢測器,例如,紫外光度檢測器、示差折光檢測器、熒光光度檢測器等;

  (7)液相色譜與氣相色譜相比較,高效液相色譜同樣具有高靈敏度、高效能和高速度的特點。

  高效液相色譜的定性和定量分析,與氣相色譜分析相似,在定性分析中,采用保留值定性,或與其他定性能力強的儀器 分析法連用;在定量分析中,采用測量峰面積的歸一化法、內標法或外標法等,但高效液相色譜在分離復雜組分式樣時,有些組分常不能出峰,因此歸一化法定量受 到限制,而內標法定量則被廣泛使用。

色譜技術

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